İstifadə zamanı (20-30 dəq) buzda saxlandığı müddətcə RIPA buferini 2-3 dəfə dondurub əridə bilərsiniz. Buferi -80 dərəcə C-də dondurulmuş halda saxlayın.
RIPA buferini nə qədər saxlaya bilərəm?
1. Bufer davamlı olaraq istifadə ediləcəksə, 10x tamponun 1-2 həftə ərzində 4°C-də saxlanması tövsiyə olunur. Daha uzun müddət üçün bufer -20°C-də saxlanmalıdır. Çoxlu kiçik eksperimentlər aparılacaqsa, 10x tamponun bölünməsi tövsiyə olunur.
RIPA buferi burada saxlanıla bilərmi?
Hazırlanmış RIPA buferi hissələrə bölünməli və −20°C-də saxlanmalıdır. Dərhal istifadə etməzdən əvvəl ərimiş alikvota proteaz və/və ya fosfataz inhibitorlarını əlavə edin. Bir mililitr tampon təxminən 5 milyon hüceyrəni parçalamaq üçün kifayətdir. …
RIPA lizatlarını necə saxlayırsınız?
Hazırlanmış lizatları mümkün qədər tez istifadə edin və mümkün qədər qısa müddətə saxlayın. Lizatları - 80℃ səviyyəsində mümkün qədər uzun müddət saxlayın. Uzun müddət saxlanılması lazım olan lizatlar üçün, deqradasiyanın qarşısını almaq üçün təzə hazırlanmış boruları mövcud -80 ℃ dondurucuya köçürün.
RIPA buferini necə əridirsiniz?
Hüceyrələrdən son yuma məhlulu çıxarıldıqdan sonra hüceyrə qranuluna müvafiq həcmdə RIPA Buferi (0,5-5 × 107 hüceyrəyə 1 ml) əlavə edin və hüceyrələri tamamilə yenidən dayandırmaq üçün qısa müddət ərzində qarışdırın və ya burulğan edin. Buz üzərində və ya soyuducuda (2–8 °C) beş dəqiqə inkubasiya edin.
