Vortexing Təsadüfi hazırlıq RT edirsinizsə, onu yararsız etmək üçün RNT-nizi kəsməyəcək - yalnız uzun mRNT-ni klonlaşdırmaq istəyirsinizsə. Invitrogen texniki dəstəyi də düzgündür. Xloroform Trizoldan daha ağırdır və borunun dibinə çökəcək.
RNT-ni burulğan etmək təhlükəsizdirmi?
Trizol lizatlarını və ya RNT nümunələrini burulğanla kəsməyin. Ekstraksiyadan sonra RNT nümunələrini daima buz üzərində saxlayın. Bu protokol 1,5 və ya 2 mL boruda 1 ml Trizol lizizə edilmiş nümunələr üçün nəzərdə tutulub.
RNT-ni qızdıra bilərsiniz?
Ona görə də yüksək temperaturdan ( +65°C-dən yuxarı) qaçın, çünki bunlar RNT-nin bütövlüyünə təsir edir. Bunun əvəzinə, ikinci dərəcəli strukturları əritmək üçün RNT-ni denaturasiya edən tamponların iştirakı ilə 15 dəqiqə ərzində +65°C-yə qədər qızdırın.
RNT qranullarını necə yenidən dayandırırsınız?
qranulunuzu isti su (40-50 deq. selc) ilə yenidən dayandırın. 10 dəqiqə 45 ° C-də inkubasiya edin. onları 4-6 saat ərzində +4-də qoyun.
RNT-ni necə çökdürürsünüz?
A.
Duz konsentrasiyası tənzimləndikdən sonra RNT 2,5 həcm etanol və ya 1 həcm izopropanol əlavə edilərək və hərtərəfli qarışdırılaraqçökdürülə bilər. sonra -20° C-də ən azı 15 dəqiqə soyudulur.
