Bimolekulyar Flüoresan Tamamlama (BiFC) analizi canlı hüceyrə təsvirindən və ya sabit hüceyrələrdən istifadə edərək zülal-zülal qarşılıqlı əlaqəsini in vivo olaraq birbaşa vizuallaşdırmaq üçün istifadə edilən bir üsuldur. … BiFC ilk dəfə Hu və başqaları tərəfindən təsvir edilmişdir.
Bimolekulyar flüoresan tamamlama necə işləyir?
BiFC-nin iş prinsipi flüoresan zülalın iki seqmentinin fraqmentlərdə zülal-zülal qarşılıqlı təsiri səbəbindən bir-birinə yaxın olduqda birləşməsi nəticəsində flüoresan kompleksin inkişafına əsaslanır, yəni., BiFC-də flüorofor amin və karboksil terminal uçlarına bölünür.
BiFC testi nədir?
bimolekulyar flüoresan tamamlama (BiFC) analizi canlı hüceyrələrdə protein qarşılıqlı təsirinin sadə və birbaşa vizuallaşdırılmasına imkan verir (45). BiFC yanaşması flüoresan zülalın qeyri-flüoresan fraqmentləri ilə birləşdirilən iki zülal bir-biri ilə qarşılıqlı əlaqədə olduqda flüoresan kompleksinin əmələ gəlməsinə əsaslanır (Şəkil
BiFC testi niyə edilir?
BiFC-nin ideyası maraqlanan zülallarınızla birləşdirilən GFP yarılarını ifadə etməkdir POI-lər qarşılıqlı əlaqədə olarsa, funksional GFP əldə etmək üçün hər iki yarını bir araya gətirə bilərsiniz. Hüceyrədə ifadə edilən GFP-nin yarısı varsa, GFP antikorunun onu aşkarlaya bilməsi məni təəccübləndirmir.
BiFC geri çevrilirmi?
BiFC komplekslərinin dönməzliyi yaxşı sənədləşdirilmişdir (10) və belə görünür ki, hamısı olmasa da, əksər floresan protein əsaslı BiFC sistemləri geri dönməzdir (8, 33, 43, 48–51).
